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你知道細胞培養(yǎng)瓶清洗分哪幾個步驟嗎
點擊次數(shù):5293 更新時間:2019-09-24
細胞培養(yǎng)瓶就是平時我們用來培養(yǎng)細胞的儀器。一種是玻璃制品,另外是塑料制品,而且它的底部也有不同的形狀,常見的有正方形和長方形的,當然還有三角形也是比較常見的形狀,大小各異,從容量來分可以分為5毫升至500毫升等多種可供選擇。瓶子的表面還可以經(jīng)過一定的改造和處理,因為有些細胞的培養(yǎng)需要的是貼壁的培養(yǎng)方式,所以,根據(jù)培養(yǎng)瓶壁的面積大小還可以進行一定的分類。
細胞培養(yǎng)瓶是進行長時間細胞培養(yǎng)和細胞擴增的理想之選,能有效防護細胞免受污染。細胞培養(yǎng)瓶從防止污染的角度而研發(fā),為細胞培養(yǎng)提供安全保護。透氣性培養(yǎng)瓶蓋具有創(chuàng)新性濾膜,防止細胞污染,確保良好的氣體通透性。生產(chǎn)過程中對每個培養(yǎng)瓶進行100%壓力測試,大程度上保證實驗過程安全。*的圓弧形瓶頸設計,大大提高了培養(yǎng)瓶的可操作范圍,確保細胞接種、培養(yǎng)基更換等操作更加簡便、安全和可靠地進行。
一、浸泡:
1、新的細胞培養(yǎng)瓶由于在生產(chǎn)過程中使玻璃表面呈堿性并帶有鉛、砷等對細胞有毒的物質(zhì),故要先將培養(yǎng)瓶于5%稀鹽酸溶液中浸泡過夜。浸泡時,*浸入,瓶內(nèi)無氣泡空隙殘留。
2、使用過后的培養(yǎng)瓶應立即于加有洗衣粉的自來水中浸泡,至少6h。浸泡時,*浸入,瓶內(nèi)無氣泡空隙殘留。
二、刷洗:
用軟毛刷刷洗培養(yǎng)瓶,以去除瓶內(nèi)外表面的雜質(zhì)。需注意兩點:一是防止損壞培養(yǎng)瓶內(nèi)表面光潔度以影響細胞的生長,刷洗時不宜用力過猛;二是不能留有死角,要特別注意瓶角和細胞貼壁面的刷洗。刷洗后要將培養(yǎng)瓶沖洗干凈,一般至少要沖20遍,直至瓶壁不掛水珠。放入烘箱內(nèi),烘干。
三、泡酸:
泡酸可*清除培養(yǎng)瓶內(nèi)殘留的未刷洗掉的微量雜質(zhì)。將培養(yǎng)瓶泡酸時,要戴3層手套,注意防止酸液濺起來,灼傷皮膚,應將瓶子輕輕浸入酸液。瓶內(nèi)*充滿酸液,不留氣泡空隙,一般需浸泡4~6h。(由于我們的酸液顏色不是紅棕色,需浸泡過夜。)
注意:瓶蓋不能泡濃酸,應置于5%稀鹽酸溶液中浸泡,*沒入酸液中。
四、沖洗:
用流水*沖洗培養(yǎng)瓶。首先用自來水將細胞培養(yǎng)瓶子灌滿,再倒掉,重復20遍以上,直至不留任何殘跡,瓶壁不掛水珠;然后用二蒸水洗2~3遍;后用三蒸水洗1遍。放入烘箱內(nèi),烘干。備用。
五、滅菌:
用前1~2天,取出瓶子,擰松蓋子,用牛皮紙包住瓶口,系上繩子,貼上滅菌指示膠帶,作好標記。或者擰松蓋子,直接放入鋪有錫箔紙的鋁盒內(nèi),鋁盒外包上報紙,系上繩子,貼上滅菌指示膠帶,作好標記,121℃,30min滅菌。滅菌后,待溫度降到60℃以下時,開蓋取出,放入無菌烘箱內(nèi)烘干。烘干后,擰緊瓶蓋,取出。噴灑酒精后放入超凈工作臺或放入專門放置滅菌后物品的柜子里。